概述活菌細胞濃度測量在發酵過程中具有非常重要的作用。通過它可以了解生物反應器中菌體或細胞生長狀況,也可以了解***些描述菌體或細胞生長或生產能力的間接參數,如比生產速率,比基質消耗速率,細胞代謝流衡算等。
然而由于活細胞濃度傳感技術的困難,傳統的測量方法還是通過手工取樣測量。操作復雜,滯后時間長。尤其是在解決區分培養基顆粒,微載體,絲狀菌濃度檢測等問題上都有局限性。
憑借其專業的技術和豐富的經驗,開發出ABER原位活細胞在線檢測儀。為發酵過程軟測量技術提供了全新和重要的技術支撐。在廣大工業生產和實驗中有廣泛的應用。
ABER原位活細胞在線檢測儀的基本功能與應用
功能: ABER能實時在線檢測發酵罐內活細胞的濃度,密度,干重,生物量體積,電容大小,導電率大小;而不受細胞碎片,細胞團塊,死細胞,發酵液泡沫,微載體顆粒等影響。
適用范圍:動植物細胞,酵母,細菌藻類等種類的研究和生產質量控制。
認證: 廣泛適用于發酵生產工藝中的質量控制。符合ISO,FDA,cGMP等認證。
原理——雙電極電容法
1987年Kell***先描述了測量細胞量的雙電極性質。生物量測量是采用圖1中所示的4個鉑金電極,外面兩個外電極產生***個交變的電場,兩個內電極測量電壓。在緩沖液環境中,兩個外電極間使溶液內的離子向相反方向移動形成溶液的電導率。
活細胞細胞膜完整,在電場中被極化而形成電容。而這個電容值會被ABER 準確檢測出來,用已標志生物量(BIOMASS)不同的細胞種類會有不同的電容值。其大小和細胞的體積也呈***定比例。
而死細胞(膜破裂),氣泡或是細胞碎片因不能形成***個電容,所以ABER將不會將其檢測到。
ABER的探頭由FDA所認證的材料316L鋼所構成,保證其精度和耐用度。可經受原位蒸汽滅菌。
ABER的應用的實例:
***,微載體培養培養監測:傳統方法對通過微載體來培養的動物細胞計數相當困難。需要離線取樣再計數細胞核,但是卻沒有辦法對其中活細胞的數目作出準確判斷;由于載體材料是均***的,不能形成電容。ABER能夠檢測出微載體中活細胞的數目,而且不受微載體顆粒的影響。
二,絲狀菌生長狀態監測:絲狀菌發酵(如抗生素生產)中容易產生絲狀菌結團、結球,沒有明顯的細胞界限。傳統的方法(如濁度法,染色法)會產生很大的誤差。在評估菌生長情況或放大罐移種菌量時只能通過“經驗”來判斷;ABER能夠準確測量出絲狀菌包括團塊中的生物量避免由于經驗不足造成產量下降。
三,監測發酵***致性,方便做發酵放大研究:ABER220系列可以配上多個探頭,同時監測多個發酵罐發酵情況。結合各種檢測參數,了解菌體或細胞的生長情況以判斷“收割”***佳時間。
四,監測在線發酵過程,方便做發酵過程優化研究與生產控制:對灌注發酵罐中細胞的濃度進行監控,指導細胞返罐量和地物流加速率可促進重組蛋白生產自動化,并提高產量及降低純化難度;同時結合其他檢測參數也可以更加容易判斷染菌,菌絲體“自溶”等現象。
技術參數:T E C H N I C A L S P E C I F I C A T I O N S
檢測功能: 活細胞/ml,干重g/l,活細胞比率(相對顆粒體),電容值,電導率
細胞種類: 動物細胞,昆蟲細胞,酵母,真菌,植物細胞,細菌
電導率范圍: 1 ~ 40mS/cm.
分辨率: 酵母 / 真菌 / 動物細胞 0.1 g/l干重或 1x 105~ 1 x 106個/ml;細菌1g/l 干重或 109個/ml.
離線檢測功能型號: The Model 920
在線檢測功能型號: The model 920,220,210,200
接口: RS 232
認證: FDA,CGMP,ISO