什么是酶標(biāo)儀?使用時(shí)有哪些要點(diǎn)需要注意?
酶標(biāo)儀可能多數(shù)人對(duì)它并不是很熟悉,酶標(biāo)儀(MicroplateReader)即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,是應(yīng)用酶標(biāo)法原理,對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過(guò)偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。酶標(biāo)儀的工作原理核心是用比色法來(lái)進(jìn)行分析。測(cè)定***般要求測(cè)試液的***終體積在250μL以下,用***般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越廣泛,同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。目前***內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開(kāi)展了酶免檢測(cè)項(xiàng)目,如:乙肝五項(xiàng)、愛(ài)滋病檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測(cè)、激素檢測(cè)等。過(guò)去多數(shù)采用目測(cè)方法,報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。***內(nèi)多***權(quán)威機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測(cè)定的原始數(shù)據(jù),而各廠***的試劑盒說(shuō)明書(shū)沒(méi)有是讓用目測(cè)的。同時(shí)酶免檢測(cè)的項(xiàng)目往往是***些實(shí)質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、愛(ài)滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、愛(ài)滋等EIA試劑檢測(cè)是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
從結(jié)構(gòu)上來(lái)說(shuō),酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型,單通道又分為自動(dòng)型和手動(dòng)型兩種。其中,自動(dòng)型的儀器設(shè)有X和Y兩個(gè)方向的驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),在機(jī)械裝置的驅(qū)動(dòng)下,微孔板上的小孔***個(gè)個(gè)依次進(jìn)入光束下面測(cè)試。手動(dòng)型則靠手移動(dòng)微孔板來(lái)進(jìn)行測(cè)量。在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上,又發(fā)展了多通道、全自動(dòng)型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀***般都是自動(dòng)型的,它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測(cè)器。如8通道的儀器,設(shè)有8條光束(或8個(gè)光源)、8個(gè)檢測(cè)器和8個(gè)放大器。在機(jī)械驅(qū)動(dòng)裝置的作用下,樣品被8個(gè)***排、8個(gè)***排檢測(cè)。多通道酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度快,但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,價(jià)格也較貴,多用于大中型醫(yī)院。酶標(biāo)儀的其他部分的結(jié)構(gòu),與光電比色計(jì)和小型生化分析儀基本相同。
酶標(biāo)儀在使用時(shí)需要注意外部的工作環(huán)境,該儀器是***種精密的光學(xué)儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,還能夠延長(zhǎng)其使用壽命:
1、儀器應(yīng)放置在無(wú)磁場(chǎng)和干擾電壓的位置;
2、儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下;
3、為延緩光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽(yáng)光直射;
4、操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間;
5、操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定;
6、操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵;
7、保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面,以及足夠的操作空間。
同時(shí),即使有了合適的工作環(huán)境,也需要注意儀器的操作規(guī)范,酶標(biāo)儀的功能是用來(lái)讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng):
1、使用加液器加液,加液頭不能混用;
2、洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染;
3、嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確;
4、在測(cè)量過(guò)程中,請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手;
5、請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請(qǐng)洗手;
6、如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒的操作說(shuō)明,以防對(duì)操作人員造成損害;
7、如果儀器接觸過(guò)污染性或傳染性物品,請(qǐng)進(jìn)行清洗和消毒;
8、不要在測(cè)量過(guò)程中關(guān)閉電源;
9、對(duì)于因試劑盒問(wèn)題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),以達(dá)到***佳效果;
10、使用后蓋好防塵罩。