液相色譜儀的分類和選擇
液相色譜儀是***種常用的色譜分析儀器,利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定。通過檢測器時,樣品濃度會被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。儀器主要由儲液器、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運動時,經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。與試樣預處理技術相配合,液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
液相色譜儀按不同標準分類有多種:
1、按分離目的可分:實驗室液相色譜儀和工業(yè)液相色譜儀。
2、按固定相物理狀態(tài)可分:液液色譜儀和液固色譜儀。
3、按色譜柱形狀可分:填充柱液相色譜儀和平板液相色譜儀。
4、按分離原理可分:吸附液相色譜儀、分配液相色譜儀、離子交換液相色譜儀和凝膠液相色譜儀。
5、按分離模型可分:線性液相色譜儀和非線性液相色譜儀。
6、按分離動力學過程可分:迎頭液相色譜儀、頂替液相色譜儀和洗脫液相色譜儀。
7、按操作壓力可分:低壓液相色譜儀、中壓液相色譜儀和高壓液相色譜儀。
8、按結(jié)構(gòu)可分:臺式液相色譜儀和落地式液相色譜儀。
9、按分離規(guī)??煞郑何⑿鸵合嗌V儀、小型液相色譜儀和大型液相色譜儀。
10、按功能可分:分析型液相色譜儀和制備型液相色譜儀。
那如何選擇液相色譜儀呢?判斷液相色譜儀的指標有噪音,漂移,***小檢測濃度,定性定量重復性等。下面給大***介紹幾個選擇液相色譜儀的參考方法:
1.液相色譜儀噪音是指由液相色譜儀的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他液相色譜儀非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關系到液相色譜儀檢測器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。
2.液相色譜儀檢測器***小檢測濃度(***小檢測限)是反映液相色譜儀檢測器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL:液相色譜儀***小檢測濃度Nd:噪音C:液相色譜儀樣品濃度***小檢測濃度H:樣品峰高)。
3.液相色譜儀檢測器漂移是指儀器穩(wěn)定后***段時間內(nèi)基線漂離液相色譜儀基線原點的距離,通常用來衡量液相色譜儀穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的液相色譜儀能在較短的時間內(nèi)達到穩(wěn)定,從而在***定程度上提高了液相色譜儀分析效率。
4.液相色譜儀定性定量重復性定性定量重復性主要是考核液相色譜儀穩(wěn)定性的指標,這對于分析液相色譜儀樣品來說是非常重要的。好的液相色譜儀其穩(wěn)定性應該是十分***的,這就要求多次液相色譜儀進樣保留時間及含量的***致性,這樣做出來的液相色譜儀檢測結(jié)果才能使人信服。
5.液相色譜儀操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的。操作越簡單,有利于提高液相色譜儀分析效率,也為以后液相色譜儀分析方法的拓展提供有力的幫助。
液相色譜法已成為解決生化分析問題十分有前途的方法。由于液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用也是***個重要的發(fā)展方向。液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。