選購(gòu)高速逆流色譜儀要注意哪些關(guān)鍵性指標(biāo)?
高速逆流色譜簡(jiǎn)稱HSCCC,是***種液-液色譜分離技術(shù),它的固定相和流動(dòng)相都是液體,沒有不可逆吸附,具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域,特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是***種有效的新型分離技術(shù),適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
高速逆流色譜儀利用液液兩相的逆流分配,在沒有固體填料、不需使用固態(tài)固定相的情況下,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的***系列的腔體中,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,螺旋柱在行星運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的離心力,使互不相溶的兩相不斷互相混合,同時(shí)保留其中的***相,使用恒流泵連續(xù)輸入另***相,樣品溶質(zhì)在兩相之間反復(fù)分配,按分配系數(shù)的次序,被依次洗脫出來,它替代了傳統(tǒng)制備型高效液相色譜的填充柱。
那在選購(gòu)***臺(tái)高速逆流色譜儀的時(shí)候,哪些指標(biāo)是衡量其性能的關(guān)鍵指標(biāo)呢?
(***)固定相保留率
由于高速逆流色譜儀的固定相是液體,在分離過程中如何將液體固定相***直保留在里面,是所有生產(chǎn)廠***和使用者***關(guān)心的問題,它是由儀器的本身性能決定的,它與公轉(zhuǎn)半徑、自轉(zhuǎn)半徑、旋轉(zhuǎn)速度等因素有關(guān),也與流動(dòng)相的流速有關(guān)聯(lián),與溶劑體系關(guān)系不大;***好設(shè)備的固定相保留率可以達(dá)到90%;***般設(shè)備的固定相保留率為50%。
如果設(shè)備的固定相保留率較低,則對(duì)兩相溶劑體系的選擇和配比要求就高,使用者就需要不斷調(diào)整溶劑配比,進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)摸索,找到***佳的配方,以提高樣品的分離度,才能將樣品中的多個(gè)成分分離出來;如果設(shè)備的固定相保留率很高,對(duì)兩相溶劑體系的選擇和配比要求就十分寬松,稍微調(diào)整就能將樣品中的多個(gè)成分分離出來,更為重要的是有些樣品只有在高的固定相保留率下才能分開,固定相保留率低就無能為力了。
(二)線圈的數(shù)量和柱體積
近幾年動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)大幅提高,***先實(shí)現(xiàn)了每個(gè)線圈可以獨(dú)立繞制就能平衡,其次完成了多個(gè)線圈混合繞制,***終實(shí)現(xiàn)了***臺(tái)儀器上可以放置多個(gè)線圈的夢(mèng)想,經(jīng)常配置兩個(gè)線圈或四個(gè)線圈。
柱體積是由線圈的直徑和長(zhǎng)度決定的,其大小影響到上樣量的多少,合理的配置柱體積可以覆蓋大部分樣品的制備。如果條件允許,配置4個(gè)不同柱體積的線圈,使用起來將更方便,能實(shí)現(xiàn)線圈之間的串并聯(lián),從而提高樣品的分離效果和分離能力。
(三)線圈的材質(zhì)
高速逆流色譜儀的線圈材質(zhì)***般使用PTFE材料,它耐酸耐堿,同時(shí)適合所有的有機(jī)溶劑,材質(zhì)價(jià)格也便宜,重量較輕,很容易實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)平衡,但唯***缺點(diǎn)是耐壓較低,在高速旋轉(zhuǎn)的情況下,工作壓力超過10bar或者線圈出口堵塞,PTFE線圈就有可能爆裂,產(chǎn)生溶劑泄漏;***旦發(fā)生內(nèi)部線圈爆裂,對(duì)設(shè)備將是毀滅性的,修復(fù)的成本是十分昂貴的;采用316不銹鋼制作線圈,是近幾年動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)大幅提高以后才出現(xiàn)的,徹底解決了高速逆流色譜儀耐壓低的缺陷,工作壓力可以承受1000bar,由于316不銹鋼材質(zhì)較重,成本高,線圈繞制難度大,動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)要求高,從而導(dǎo)致儀器整體價(jià)格偏高;鈦合金是近幾年出現(xiàn)的***種新型材料,它克服了316不銹鋼材質(zhì)較重的缺點(diǎn),對(duì)動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)要求不高,但鈦合金材質(zhì)的價(jià)格比316不銹鋼要貴出很多,是三種材質(zhì)中的儀器價(jià)格***貴的。
除此之外,設(shè)備的各個(gè)安全保護(hù)功能,進(jìn)樣六通閥,以及不同體積的樣品定量環(huán)是高速逆流色譜儀必須配置的,以便于今后的安全保障和使用方便。
高速逆流色譜在天然產(chǎn)物有效成分的分離純化領(lǐng)域中有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),還可以實(shí)現(xiàn)多種形式的梯度洗脫過程,既可用于天然植物粗提物的去除雜質(zhì),也可用于***后產(chǎn)物的精制,甚至直接從未經(jīng)處理的粗提物***步純化得到純品。隨著越來越多的研究者的加入,高速逆流色譜將得到更加廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。